Zašto spektrofotometar mora biti podešen na određenu talasnu dužinu?
Zašto spektrofotometar mora biti podešen na određenu talasnu dužinu?

Video: Zašto spektrofotometar mora biti podešen na određenu talasnu dužinu?

Video: Zašto spektrofotometar mora biti podešen na određenu talasnu dužinu?
Video: Važnost Q faktora antene. 2024, Novembar
Anonim

Kada podesite talasna dužina na spektrofotometar , ti su mijenjanje položaja prizme ili difrakcijske rešetke tako da se razlikuje talasne dužine svetlosti su usmjerena na prorez. Što je širina proreza manja, to je bolja sposobnost instrumenta da razluči različite spojeve.

Zbog toga, na kojoj talasnoj dužini će biti podešen spektrofotometar?

U zavisnosti od opsega talasne dužine izvora svetlosti, može se klasifikovati u dva različita tipa: UV-vidljivi spektrofotometar: koristi svetlost u ultraljubičastom opsegu (185 - 400 nm) i vidljivom opsegu (400 - 700 nm ) spektra elektromagnetnog zračenja.

Isto tako, zašto trebate kalibrirati spektrometar svaki put kada promijenite talasnu dužinu? Spektrofotometar treba biti kalibriran protiv slijepog rješenja tako to mjerenja nakon toga mogu koristiti apsorbanciju slijepog rastvora kao nultu referencu. Mjera kapaciteta tvari da apsorbira svjetlost određene talasna dužina.

na kojoj talasnoj dužini treba meriti očitavanja?

Uzmi čitanja u intervalima od 5 nm malo prije i poslije ovoga talasna dužina . Na primjer, ako je maksimalna apsorpcija pronađena na 450 nm, onda da se dobije preciznija čitanje od λmax, uzeti apsorbanciju čitanja na 440, 445, 455 i 460 nm.

Zašto mjerite apsorbanciju otopine na 550 nm?

Proteini reaguju sa ionima bakra u alkalnim rješenje da se formira kompleks ljubičaste boje koji apsorbuje svetlost na 550 nm . Stoga, by merenje koncentracija kompleksa, koristeći A550 ( Upijanje at 550 nm ), ti su takođe merenje koncentraciju proteina.

Preporučuje se: