Sadržaj:

Kako pronalazite koncentraciju DNK iz apsorbancije?
Kako pronalazite koncentraciju DNK iz apsorbancije?

Video: Kako pronalazite koncentraciju DNK iz apsorbancije?

Video: Kako pronalazite koncentraciju DNK iz apsorbancije?
Video: ДНК и РНК 2024, Novembar
Anonim

Koncentracija DNK se procjenjuje mjerenjem apsorbancija na 260nm, podešavanjem A260 mjerenje zamućenosti (mjereno pomoću apsorbancija na 320 nm), množeći faktorom razblaženja i koristeći odnos koji je A260 od 1,0 = 50µg/ml čiste dsDNK.

Isto tako, ljudi pitaju, kako pronalazite koncentraciju DNK?

Da biste odredili koncentraciju DNK u originalnom uzorku, izvršite sljedeći izračun:

  1. Koncentracija dsDNK = 50 μg/mL × OD260 × faktor razrjeđenja.
  2. Koncentracija dsDNK = 50 μg/mL × 0,65 × 50.
  3. Koncentracija dsDNK = 1,63 mg/mL.

Takođe, šta je dobra koncentracija DNK? A dobro kvaliteta DNK uzorak treba da ima A260/A280 odnos 1,7-2,0 i A260/A230 omjer veći od 1,5, ali budući da osjetljivost različitih tehnika na ove kontaminante varira, ove vrijednosti treba uzeti samo kao vodič za čistoću vašeg uzorka.

Da li na ovaj način DNK apsorbuje na 280 nm?

Odnos apsorbancije na 260 nm vs 280 nm je obično se koristi za procjenu DNK kontaminacija proteinskih otopina, jer proteini (posebno aromatične aminokiseline) apsorbirati light at 280 nm.

Kako koristite NanoDrop za koncentraciju DNK?

U osnovi nanodrop daje vam mogućnost odabira DNK , RNK, proteini. Morate odabrati DNK , zatim stavite 2 ΜL vode (mili Q preferirano) odaberite "Prazno" nakon toga stavite još 2 ΜL vode da potvrdite da je mjera 0. Zatim stavite 2 ΜL svog uzorka. Dobićete merenje.

Preporučuje se: