Zašto se nitrocelulozna membrana koristi u Southern blottingu?
Zašto se nitrocelulozna membrana koristi u Southern blottingu?

Video: Zašto se nitrocelulozna membrana koristi u Southern blottingu?

Video: Zašto se nitrocelulozna membrana koristi u Southern blottingu?
Video: Hidrofor provera pritiska u burencetu 2024, Novembar
Anonim

U originalnom protokolu nitrocelulozna membrana bio korišteno za upijanje u slučaju da Southern blot ali u novije vrijeme najlon membrane implementirani su za upijanje proces zbog njihove sposobnosti da efikasno vežu veću količinu DNK što omogućava Southern blot da se izvede sa manjom količinom

Shodno tome, zašto se nitrocelulozna membrana koristi u upijanju?

Nitrocelulozne membrane su popularna matrica korišteno u proteinima upijanje zbog njihovog visokog afiniteta za vezivanje proteina, kompatibilnosti sa raznim metodama detekcije (hemiluminiscencija, hromogena i fluorescencija) i sposobnosti imobilizacije proteina, glikoproteina ili nukleinskih kiselina.

Takođe, zašto se DNK prenosi na najlonsku membranu? Korišćenjem 0,4 M NaOH kao transfer rastvarač nakon kratke prethodne obrade gela u kiselini, DNK se depurinira tokom transfer . Izloženost DNK na ultraljubičasto svjetlo, bilo u gelu ili slijedećem transfer to najlonska membrana , smanjuje njegovu sposobnost hibridizacije.

Dodatno, koja je svrha Southern blotinga?

A Southern blot je metoda koja se koristi u molekularnoj biologiji za detekciju specifične sekvence DNK u DNK uzorcima. Southern blotting kombinuje transfer elektroforezom odvojenih DNK fragmenata na filtersku membranu i naknadnu detekciju fragmenata hibridizacijom sonde.

Kako Southern blotting pomaže u forenzičkim studijama?

A Southern blot , nazvan po svom izumitelju Edwinu Southern , je metoda koja se koristi za provjeru prisutnosti specifične DNK sekvence u uzorku DNK. Jednom kada se DNK pojedinca probavi sa specifičnim restrikcijskim enzimom, rezultujući fragmenti se analiziraju pomoću Southern blot analiza.

Preporučuje se: